Przeciwciała Cusabio Tag/ Loading Control obejmują wysoce specyficzne przeciwciała monoklonalne i poliklonalne.

Przeciwciała znacznikowe mogą być używane do wykrywania i oczyszczania wielu białek z tym samym znacznikiem. Gdy niektóre białka docelowe nie mogą być poddane immunoprecypitacji bez specyficznych przeciwciał, epitop może być użyty do oznaczenia białka, a następnie wybrać przeciwciało znacznikowe dla tego epitopu, aby można było kontynuować immunoprecypitację. Wraz z szybkim rozwojem proteomiki, w ostatnich latach znacznie wzrosło wykorzystanie białek rekombinowanych. Rekombinowane hybrydy zawierają znacznik powinowactwa, taki jak GST, Myc, His itp., który może być stosowany do wspomagania oczyszczania białka docelowego, co było szeroko stosowane.

Przeciwciała control loading są używane do oceny wydajności Western blot i porównania ilości białka załadowanego do każdej studzienki w całym żelu, tak aby można było określić równe obciążenie, jak również jakość próbek. Ważne jest, aby używać kontroli obciążenia w celu określenia ekspresji białka i interpretacji wyników Western blot. Niektóre popularne przeciwciała kontroli obciążenia to Beta Actin, GAPDH, Histone H3, Alpha Tubulin i Beta Tubulin, itp.

Nie można przecenić znaczenia jakości przeciwciał kontrolnych. Jeśli kontrola obciążenia jest wątpliwa, wszystkie wyniki mogą być wątpliwe. Cusabio jest tutaj, aby złagodzić te obawy. Firma Cusabio oferuje szeroki wybór przeciwciał monoklonalnych kontrolujących ładunek, w tym GAPDH, α-tubulinę i β-aktynę dla kilku gatunków. Mamy również kilka sprzężonych przeciwciał kontrolnych, takich jak przeciwciała kontrolne sprzężone z HRP lub biotyną.

Znacznik, lub znacznik epitopu, jest sekwencją antygenową, taką jak białko lub polihistydyna, która jest determinantą wiązania specjalnego przeciwciała, co określa specyficzność antygenu. Znacznik jest zwykle dodawany do interesującego nas białka za pomocą inżynierii genetycznej, tworząc białko fuzyjne, które jest wykrywane przez odpowiednie przeciwciało. Przeciwciała, które specjalnie rozpoznają i wiążą te epitopy znacznika są nazywane przeciwciałami znacznika epitopu lub przeciwciałami znacznika. Gdy nie są dostępne specyficzne przeciwciała do wykrywania interesujących nas białek, przeciwciała znacznikowe są alternatywą i są potrzebne. Przeciwciała znacznikowe są używane do izolacji i oczyszczania białek, śledzenia ekspresji i lokalizacji białek, interakcji białko-białko. Niektóre powszechne eksperymenty, takie jak ELISA, western blotting, immunofluorescencja i immunoprecypitacja często wykorzystują różne przeciwciała znacznikowe.

Przeciwciała kontrolne, jak sama nazwa wskazuje, są serią przeciwciał kontroli wewnętrznej. Są one specyficzne dla wysoko i konstytutywnie wyrażonego białka. Ogólnie, przeciwciała kontrolne można podzielić na dwie grupy, w tym przeciwciała kontroli izotypu i przeciwciała kontroli obciążenia. Najlepsze przeciwciało kontroli obciążenia powinno być stale i stabilnie wyrażane w różnych tkankach i w różnych warunkach fizjologicznych i patologicznych. Białka kontrolne są zazwyczaj idealnymi kandydatami na przeciwciała kontroli obciążenia. Przeciwciała kontroli obciążenia są niezbędne do uzyskania dokładnych danych dotyczących ekspresji w metodzie western blotting. Są one odpowiedzialne za monitorowanie białek docelowych w Western Blotting, potwierdzanie równego obciążenia próbki i transferu żelu do membrany, który powoduje bardziej intensywne barwienie na brzegach plamki, oraz ochronę przed „efektem brzegowym” w celu normalizacji wyników. Przeciwciała kontroli obciążenia mogą być również używane do wykrywania, czy wystąpiły różnice w obciążeniu białkami i mogą interpretować zaobserwowane różnice w docelowym pasmie(-ach).